تُستخدم الشرائح المجهرية لفحص الكائنات وحيدة الخلية والنظر عن قرب في النباتات والكائنات الصغيرة. هناك نوعان من الشرائح المعدة: الحوامل الجافة والتركيبات الرطبة. يتم استخدام كل نوع من طرق التحضير لتركيب أنواع مختلفة من الخلايا. إذا كنت مبللاً بتركيب عينة شاحبة أو شفافة بشكل خاص ، فقد تحتاج إلى صبغ العينة بحيث تكون مرئية تحت المجهر.
خطوات
طريقة 1 من 3: تحضير أداة التثبيت الجاف
الخطوة 1. حدد شريحة نظيفة
امسك شريحة حتى تصل إلى مصدر ضوء وانظر من خلالها للتأكد من خلوها من اللطخات والأوساخ. معظم شرائح المجهر مسطحة من الأعلى والأسفل ومستطيلة الشكل. إنها واضحة ، مما يسمح للضوء من المجهر بالمرور وإلقاء الضوء على عينة العينة الشفافة. إذا كانت شريحتك متسخة أو ملطخة ، فلن تتمكن من فحص العينة بشكل فعال.
إذا وجدت أن شريحة المجهر الخاصة بك بها أي تلوث - بما في ذلك بصمات أصابعك - فقم بغسلها سريعًا بالماء والصابون السائل. جفف الشريحة باستخدام قطعة قماش نظيفة. لا تستخدم المناديل أو المناشف الورقية لأنها قد تترك وبرًا خلفها
الخطوة 2. افحص العينة لتحديد ما إذا كانت بحاجة إلى تقطيع إلى شرائح
يجب أن تكون عينة العينة شفافة (أو شبه شفافة) إلى شفافة حتى يمر الضوء من خلالها. إذا لم يتمكن الضوء من المرور بشكل كامل عبر العينة إلى عينية المجهر ، فلن تتمكن من رؤية العينة من خلال المجهر.
بعض العينات (على سبيل المثال ، خصلة شعر أو جناح حشرة) رقيقة وشفافة من تلقاء نفسها ، ولن تحتاج إلى تقطيعها بشفرة حلاقة
الخطوة 3. قم بتقطيع قطعة رقيقة من عينة العينة
استخدم شفرة حلاقة لقطع مادة العينة إلى شريحة رفيعة وشفافة. تعتبر الحوامل الجافة أبسط طريقة للتحضير لأنها لا تستخدم أي سائل بين الشريحة والعينة. يعتبر الحامل الجاف مثاليًا لفحص العينات غير المعرضة لخطر الجفاف. تشمل المواد التي عادة ما تكون جافة:
- الفلين أو خشب البلسا.
- بتلات الزهور أو الأوراق.
- أرجل أو أجنحة الحشرات.
- الشعر أو الفراء أو الريش.
الخطوة 4. ضع عينة العينة على الشريحة
استخدم زوجًا من الملقط لالتقاط شريحة رفيعة من عينة العينة. ضعه برفق على جانب واحد من الشريحة. إذا كنت تستخدم شريحة مقعرة (حيث ينخفض جانب واحد لأسفل) ، ضع العينة في وسط المنطقة المقعرة.
- ركب العينة على شريحة مقعرة إذا كنت قلقًا من أن العينة سوف تتدحرج أو تنزلق من الشريحة المسطحة. على سبيل المثال ، استخدم شريحة مقعرة إذا كنت تقوم بإعداد بتلة زهرة مجعدة تتدحرج إلى جانب أو آخر.
- بالنسبة لجميع أنواع العينات الأخرى ، ستعمل الشريحة المسطحة بشكل جيد.
الخطوة 5. ضع قسيمة غلاف فوق عينة العينة
يمنع قسيمة الغطاء عينة العينة من الانزلاق عن الشريحة. ستعمل القسيمة أيضًا على حماية عينة العينة في حالة قيام أحد مستخدمي المجهر بخفض العدسة عن طريق الخطأ لدرجة أنه ينقر على العينة.
- زلات الغطاء عبارة عن قطع زجاجية رفيعة جدًا وشفافة أو بشكل أكثر شيوعًا من البلاستيك. كل زلة حول 3⁄4 بوصة (1.9 سم) في العرض والطول.
- شريحتك المعدة جاهزة الآن للفحص تحت المجهر.
الطريقة 2 من 3: تحضير أداة التثبيت الرطبة
الخطوة 1. ضع قطرة ماء واحدة على الشريحة
استخدم قطارة لإسقاط قطرة واحدة من الماء على المركز الدقيق لشريحة مسطحة أو مقعرة. قطرة الماء هذه هي التي تعطي اسمها للجبل الرطب. يحافظ السائل على رطوبة العينة ويمنع عينات العينات العضوية الرطبة من الجفاف وتشويه شكلها. يحافظ الماء أيضًا على العينات الحية ، مثل الكائنات وحيدة الخلية.
إذا كنت ترغب في عمل شريحة دائمة باستخدام مادة عضوية ميتة ، فيمكنك استخدام طبقة رقيقة من طلاء الأظافر الشفاف بدلاً من قطرة الماء
الخطوة 2. كشط أو قطع قسم من العينة الرطبة
عادةً ما تكون عينات العينات المستخدمة للتركيبات الرطبة عبارة عن مواد عضوية رطبة أو حية. استخدم شفرة حلاقة أو عود أسنان لقص أو كشط كمية صغيرة من العينة المبللة. تشمل المواد المستخدمة بشكل شائع لصنع شرائح مبللة ما يلي:
- خلايا الخد أو لوحة الأسنان (كشط من فمك باستخدام عود أسنان).
- مقطع عرضي رفيع من ساق نبات (مقطوع بشفرة حلاقة).
- إذا كنت تدرس كائنات وحيدة الخلية ، على سبيل المثال ، فإن الأميبا أو ملاقط البراميسيوم لن تفيد كثيرًا. بدلاً من ذلك ، استخدم قطارة نظيفة لالتقاط بضع قطرات من الماء الذي تسبح فيه الكائنات وحيدة الخلية أو الطحالب.
الخطوة 3. ضع عينة العينة في قطرة الماء
اعتمادًا على نوع المادة التي تستخدمها كعينة العينة الخاصة بك ، استخدم زوجًا من الملقط أو الملقط أو المسواك لنقل العينة إلى الشريحة. ضع العينة في وسط قطرة الماء ، بحيث يتم تعليقها في السائل.
إذا كنت تستخدم قطارة لالتقاط كائنات وحيدة الخلية ، ضع قطرة أو قطرتين في قطرة الماء الموجودة بالفعل على الشريحة
الخطوة 4. ضع غطاء على الجزء العلوي من العينة الرطبة
امسك زلة الغطاء بزاوية 45 درجة. ضع إحدى الحواف لأسفل بجوار العينة الموجودة على قطرة الماء. ثم اخفض الجانب الآخر من الشريحة حتى يصبح مسطحًا أعلى العينة. يجب أن ترى قطرة (قطرات) الماء منتشرة أسفل زلة الغطاء حتى تصل إلى حوافها.
لا تنقر أو تضغط على قسيمة الغطاء بمجرد وضعها في مكانها. إذا قمت بذلك ، فسوف تخاطر بسحق عينة العينة والماء من الشريحة
طريقة 3 من 3: تلطيخ العينات الخلوية
الخطوة 1. ضع ورقة منديل ورقي مقابل إحدى حواف قسيمة الغطاء
ضع المنشفة على حافة الزلة بدون إزعاج المادة الموجودة أسفل زلة الغطاء. ستسحب المنشفة الورقية الماصة بعض الماء من أسفل زلة الغطاء ، وتسحب عامل التلوين أسفل زلة الغطاء وعلى العينة.
- إذا كانت عينة الشرائح المبللة شاحبة أو عديمة اللون (مثل مقطع عرضي لجذع نبات عديم اللون) ، فقد يكون من الصعب رؤيتها عند النظر من خلال المجهر. سيسمح لك تلطيخ العينة برؤية شكلها وملمسها بشكل أفضل.
- يتم ذلك عادةً بعد أن تكون قد فحصت بالفعل العينة الرطبة في شريحة دون تلطيخها. قد تكون الشريحة جاهزة بالفعل ، حتى لو لم تكن ملطخة.
الخطوة 2. ضع قطرة واحدة من اليود أو الميثيلين الأزرق على الجانب الآخر من قسيمة الغطاء
استخدم القطارة وقم بإسقاط المادة الكيميائية المصبوغة أعلى شريحة المجهر ، بجوار قسيمة الغطاء مباشرةً. احرص على الاستغناء عن قطرة واحدة فقط. قد يتم تشغيل عامل التلطيخ الزائد من الشريحة.
- يمكن شراء اليود أو الميثيلين الأزرق من أي متجر تعليمي أو متجر مستلزمات بيولوجيا.
- طريقة بديلة للقيام بذلك هي إضافة قطرة عامل تلطيخ إلى الماء على شريحة مبللة عند تحضيرها لأول مرة. في هذه الحالة ، لا تحتاج إلى منشفة ورقية.
الخطوة 3. انتظر حتى يتم رسم عامل التلوين تحت غطاء الشريحة
سيبدأ عامل التلوين في التسرب تحت غطاء الغطاء بينما تسحب المنشفة الورقية الماء من الجانب الآخر. قد يستغرق الأمر ما يصل إلى 5 دقائق حتى ينقع اليود أو الميثيلين الأزرق تمامًا تحت غطاء الشريحة وتشبع العينة.
بمجرد رسم اليود أو الميثيلين الأزرق على طول الطريق أسفل غطاء الشريحة ، تكون العينة مصبوغة بالكامل
الخطوة 4. امسح عامل التلوين الزائد بمنشفة ورقية نظيفة
نظف سطح الشريحة حتى لا تتسرب السوائل من الجانب. أصبحت الشريحة المبللة الآن ملطخة وجاهزة للمراقبة تحت المجهر.
